低磷低魚(yú)粉飼料中添加植酸酶和蛋白酶對(duì)草魚(yú)生長(zhǎng)性能和消化生理的影響
摘要:本試驗(yàn)旨在研究低磷低魚(yú)粉飼料中添加植酸酶和蛋白酶對(duì)草魚(yú)生長(zhǎng)性能、消化酶活性、營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)表觀消化率和免疫力的影響。試驗(yàn)選取平均體重為9.66g的健康草魚(yú)630尾,隨機(jī)分為7個(gè)組,每組3個(gè)重復(fù),每個(gè)重復(fù)30尾魚(yú)。7組草魚(yú)飼喂如下試驗(yàn)飼料:正常磷(磷酸二氫鈣添加量2.0%)正常魚(yú)粉(魚(yú)粉添加量3.0%)飼料(對(duì)照)、低磷(磷酸二氫鈣添加量1.3%)正常魚(yú)粉飼料、低磷正常魚(yú)粉并添加0.03%植酸酶飼料、正常磷低魚(yú)粉(魚(yú)粉添加量1.5%)飼料、正常磷低魚(yú)粉并添加0.05%蛋白酶飼料、低磷和低魚(yú)粉飼料、低磷低魚(yú)粉并添加0.03%植酸酶和0.05%蛋白酶飼料。飼養(yǎng)試驗(yàn)持續(xù)56d。結(jié)果顯示:與飼喂正常磷正常魚(yú)粉飼料草魚(yú)相比,飼喂低磷低魚(yú)粉飼料草魚(yú)的增重率、特定生長(zhǎng)率、營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)(干物質(zhì)、蛋白質(zhì)、鈣和磷)表觀消化率、腸道消化酶(胰蛋白酶、糜蛋白酶和淀粉酶)活性、血清溶菌酶活性均顯著降低(P<0.05),飼料系數(shù)和血清丙二醛含量顯著升高(P<0.05)。在低磷正常魚(yú)粉飼料、正常磷低魚(yú)粉飼料、低磷低魚(yú)粉飼料中分別添加植酸酶、蛋白酶、植酸酶與蛋白酶后,草魚(yú)的上述指標(biāo)均得到顯著改善(P<0.05)。以上結(jié)果表明,在低磷低魚(yú)粉飼料中添加植酸酶和蛋白酶能夠提高草魚(yú)的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)表觀消化率、腸道消化酶活性和免疫力,從而改善其生長(zhǎng)性能。
我國(guó)有著豐富的植物性蛋白質(zhì)源,如豆粕、菜籽粕、棉籽粕和花生粕等。與動(dòng)物性蛋白質(zhì)源相比,植物性蛋白質(zhì)源具有來(lái)源廣且價(jià)格相對(duì)便宜的特點(diǎn),采用植物性蛋白質(zhì)源部分替代魚(yú)粉已成為水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)可持續(xù)發(fā)展的一個(gè)重要戰(zhàn)略舉措。但是,由于水產(chǎn)動(dòng)物體溫不穩(wěn)定,消化道短,消化系統(tǒng)不完全,消化酶活性弱,對(duì)植物蛋白質(zhì)消化利用率低;同時(shí),由于植物性蛋白質(zhì)源中含有諸多抗?fàn)I養(yǎng)因子,如蛋白酶抑制因子、酚類(lèi)化合物、植酸和非淀粉多糖等,極大地限制了其在水產(chǎn)飼料中的使用。通過(guò)外源添加酶制劑的方法可破壞飼料原料中的抗?fàn)I養(yǎng)因子,提高水產(chǎn)動(dòng)物對(duì)蛋白質(zhì)、能量、脂肪、鈣(Ca)和磷(P)等營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的利用率。目前,應(yīng)用于水產(chǎn)飼料中的酶制劑主要有植酸酶、蛋白酶和非淀粉多糖酶等。植酸酶能夠?qū)⒘姿釟埢鶑闹菜嵘纤庀聛?lái),因此破壞了植酸對(duì)礦物元素的親和力,同時(shí)釋放出與植酸(鹽)結(jié)合的其他營(yíng)養(yǎng)物質(zhì),從而提高營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的利用率,并減少無(wú)機(jī)磷酸鹽的添加量,不僅對(duì)動(dòng)物具有良好的增重效果,同時(shí)可降低動(dòng)物磷排泄量,有利于環(huán)境保護(hù)。另外,水產(chǎn)動(dòng)物因其特殊的消化系統(tǒng)及生活環(huán)境等,在生長(zhǎng)發(fā)育過(guò)程中內(nèi)源消化酶可能分泌不足,特別是幼齡動(dòng)物,外源蛋白酶的添加一方面可以降解植物性原料中的抗?fàn)I養(yǎng)因子,另一方面可以促進(jìn)內(nèi)源性酶的分泌,從而改善水產(chǎn)動(dòng)物的消化環(huán)境,促進(jìn)生長(zhǎng)。目前,植酸酶已在斑點(diǎn)叉尾(Ictalurus puuctatus)、草魚(yú)(Ctenopharyngodon idellus)、花鱸(Lateolabrax japonicas)、黑鯛(Acanthopagrus schlegelii)、異育銀鯽(Carassius auratus gibelio)等水產(chǎn)動(dòng)物飼料中使用。此外,蛋白酶在尼羅羅非魚(yú)(Oreochromis niloticus)、異育銀鯽、虹鱒(Oncorhynchus mykiss)和青魚(yú)(Mylopharyngodon piceus)等水產(chǎn)動(dòng)物上得到應(yīng)用。這些研究結(jié)果表明,飼料中添加植酸酶和蛋白酶均能在不同程度上提高水產(chǎn)動(dòng)物的生長(zhǎng)性能。
植物性蛋白質(zhì)源在水產(chǎn)動(dòng)物養(yǎng)殖過(guò)程中的使用比例在不斷增加,如何充分利用其營(yíng)養(yǎng)成分,降低魚(yú)粉的使用量和對(duì)外依存度,提高飼料報(bào)酬的同時(shí)減少環(huán)境污染,已受到廣大學(xué)者的廣泛關(guān)注。因此,本研究主要集中在如何充分利用植酸酶和蛋白酶的營(yíng)養(yǎng)價(jià)值,減少磷酸二氫鈣和魚(yú)粉的使用方面。草魚(yú)是我國(guó)主要大宗水產(chǎn)養(yǎng)殖經(jīng)濟(jì)魚(yú)類(lèi),其具有生長(zhǎng)快、營(yíng)養(yǎng)豐富及味道鮮美等特點(diǎn),深受廣大消費(fèi)者的喜愛(ài)。因此,本研究以草魚(yú)為研究對(duì)象,在低磷低魚(yú)粉飼料中添加植酸酶和蛋白酶,通過(guò)測(cè)定生長(zhǎng)性能、體成分、腸道消化酶活性、營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)表觀消化率和血清免疫功能相關(guān)指標(biāo),來(lái)綜合評(píng)價(jià)飼料中添加植酸酶和蛋白酶對(duì)草魚(yú)的影響,以期為植酸酶和蛋白酶在水產(chǎn)飼料中的應(yīng)用提供部分理論依據(jù)。
材料與方法
1 試驗(yàn)材料
植酸酶和蛋白酶均由廣東某公司提供。植酸酶活性為2000 U/g,適宜pH為4.5~8.0,85℃濕熱處理后酶活性保留率達(dá)86%;蛋白酶活性為20000 U/g,適宜pH為5.0~10.0,90℃濕熱處理后酶活性保留率達(dá)92%。
2 試驗(yàn)設(shè)計(jì)與飼料配方
試驗(yàn)用健康草魚(yú)購(gòu)自廣東中山百川育苗場(chǎng)。草魚(yú)購(gòu)回后,進(jìn)行4周的馴養(yǎng)試驗(yàn),使其適應(yīng)養(yǎng)殖環(huán)境和試驗(yàn)飼料。然后選擇體格健壯、體重均勻(平均體重為9.66 g)健康草魚(yú)630尾,隨機(jī)分為7組(每組3個(gè)重復(fù),每個(gè)重復(fù)30尾),分別飼喂正常磷正常魚(yú)粉飼料(Ⅰ組)、低磷正常魚(yú)粉飼料(Ⅱ組)、低磷正常魚(yú)粉并添加植酸酶飼料(Ⅲ組)、正常磷低魚(yú)粉飼料(Ⅳ組)、正常磷低魚(yú)粉并添加蛋白酶飼料(Ⅴ組)、低磷和低魚(yú)粉飼料(Ⅵ組)、低磷低魚(yú)粉并添加植酸酶和蛋白酶飼料(Ⅶ組),具體試驗(yàn)設(shè)計(jì)見(jiàn)表1。試驗(yàn)飼料組成及營(yíng)養(yǎng)水平見(jiàn)表2。養(yǎng)殖試驗(yàn)持續(xù)56 d。在各試驗(yàn)飼料中添加0.02%的三氧化釔(Y2O3)作為指示劑,用于營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)表觀消化率的測(cè)定。飼料原料過(guò)40目篩,逐級(jí)混勻,用單螺桿擠壓機(jī)制成直徑為2 mm的沉性顆粒飼料,制粒溫度為80~90℃,顆粒飼料在通風(fēng)陰涼處晾干后置于4℃冰箱中保存?zhèn)溆谩?/span>
3 試驗(yàn)魚(yú)及飼養(yǎng)管理
養(yǎng)殖試驗(yàn)在廣東溢多利生物科技股份有限公司產(chǎn)學(xué)研基地室內(nèi)循環(huán)水養(yǎng)殖系統(tǒng)中進(jìn)行試驗(yàn)魚(yú)以重復(fù)為單位飼養(yǎng)于試驗(yàn)缸每個(gè)試驗(yàn)缸內(nèi)大小為0.6m×0.7m×0.7m(有效水體250L)。飼養(yǎng)期間,每天定時(shí)定點(diǎn)投喂(08:30、12:30和16:30),投喂30 min后收集剩料,烘干稱(chēng)重,并根據(jù)攝食情況調(diào)整投喂量。飼養(yǎng)期間,每日吸污,同時(shí)更換1/10~3/10的水量;水溫保持在(27.0±2.0) ℃,pH保持在7.0±0.5,溶解氧濃度>6mg/L。
4 指標(biāo)測(cè)定
4.1 生長(zhǎng)性能指標(biāo)
分別在正式試驗(yàn)開(kāi)始前和結(jié)束后,對(duì)各組試驗(yàn)魚(yú)進(jìn)行計(jì)數(shù)和稱(chēng)重,計(jì)算體增重率(weight gain rate, WGR)、特定生長(zhǎng)率(specific growth rate, SGR)、攝食量(feed intake, FI)、飼料系數(shù)(feed conversion rate, FCR)。各指標(biāo)計(jì)算公式如下:
WGR(%) =100×[試驗(yàn)?zāi)┲?g) -試驗(yàn)初重(g)]/試驗(yàn)初重(g);
SGR(%) =100×[ln試驗(yàn)?zāi)┲?g) -ln試驗(yàn)初重(g)]/試驗(yàn)天數(shù)(d);
FCR=攝食量(g) /增重(g) 。
4.2 飼料、全魚(yú)常規(guī)營(yíng)養(yǎng)成分分析
養(yǎng)殖試驗(yàn)開(kāi)始和結(jié)束時(shí),將試驗(yàn)魚(yú)分別饑餓24 h,用干毛巾吸干魚(yú)體表面的水分后稱(chēng)重。在養(yǎng)殖試驗(yàn)開(kāi)始前,取6尾魚(yú)進(jìn)行初始全魚(yú)營(yíng)養(yǎng)成分分析。在56 d的養(yǎng)殖試驗(yàn)結(jié)束后,每缸取2尾魚(yú)(每組6尾),用自封袋裝好后置于-20 ℃冰箱中保存,用于全魚(yú)營(yíng)養(yǎng)成分分析。飼料、魚(yú)體的常規(guī)營(yíng)養(yǎng)成分含量采用AOAC(1995)法測(cè)定,具體方法如下:在105 ℃烘箱中烘至恒重后測(cè)定水分含量;分別采用凱氏定氮法(氮×6.25)和索氏提取法測(cè)定粗蛋白質(zhì)和粗脂肪含量;在馬弗爐中灼燒(550℃)后測(cè)定粗灰分含量;分別采用乙二胺四乙酸(EDTA)絡(luò)合滴定法和鉬黃比色法測(cè)定鈣、磷含量。
4.3 營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)表觀消化率測(cè)定
在養(yǎng)殖試驗(yàn)開(kāi)始后2周,每天在投喂后采用虹吸的方法收集糞便,每天收集2次。然后用鑷子選擇新鮮、完整的、外表帶有包膜的糞便于-20 ℃冰箱中保存。試驗(yàn)結(jié)束后將收集到的糞便集中,并在烘箱中烘干(60 ℃)備用。測(cè)定糞便中粗蛋白質(zhì)、鈣、磷以及飼料和糞便中釔含量,其中釔含量的測(cè)定采用等離子體發(fā)射光譜法,其他指標(biāo)的測(cè)定方法同1.4.2。營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)表觀消化率的計(jì)算公式如下:
干物質(zhì)表觀消化率(%)=100×[1-(飼料中Y2O3含量/糞便中Y2O3含量)];
某營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)(粗蛋白質(zhì)、鈣或磷)表觀消化率(%)=100×[1-(糞便中該營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)含量/飼料中該營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)含量)×(飼料中Y2O3/糞便中Y2O3含量)]。
4.4 血清生化指標(biāo)測(cè)定
飼養(yǎng)試驗(yàn)結(jié)束后,每組隨機(jī)選擇15尾魚(yú),用經(jīng)肝素鈉試劑潤(rùn)洗后的注射器尾靜脈采血,離心制備血清后存儲(chǔ)于-80 ℃冰箱中。血清中谷草轉(zhuǎn)氨酶(glutamic oxalacetic transaminase, GOT)、谷丙轉(zhuǎn)氨酶(glutamate pyruvate transaminase, GPT)、溶菌酶(lysozyme, LZM)活性和丙二醛(malondialdehyde, MDA)含量均采用南京建成生物工程研究所生產(chǎn)的試劑盒進(jìn)行測(cè)定,具體測(cè)定步驟參照試劑盒說(shuō)明書(shū)。
4.5 腸道消化酶活性測(cè)定
快速分離經(jīng)采血后魚(yú)體的腸道,再用液氮速凍后保存于-80 ℃冰箱中。腸道中消化酶如胰蛋白酶(trypsin)、糜蛋白酶(chymotrypsin)、淀粉酶(amylase)、脂肪酶(lipase)活性以及上清液中蛋白質(zhì)含量均采用南京建成生物工程研究所生產(chǎn)的試劑盒進(jìn)行測(cè)定,具體測(cè)定步驟參照試劑盒說(shuō)明書(shū)。
5 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)及分析
本試驗(yàn)所有數(shù)據(jù)均采用平均值±標(biāo)準(zhǔn)差(mean±SD)表示,采用SPSS 18.0對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行單因素方差分析(one-way ANOVA),并結(jié)合Duncan氏法對(duì)組間數(shù)據(jù)進(jìn)行多重比較,以P<0.05作為差異顯著水平。
結(jié)果與分析
1 生長(zhǎng)性能
由表3可知,低磷低魚(yú)粉組的WGR和SGR均顯著低于對(duì)照組(正常磷和正常魚(yú)粉組,下同)(P<0.05)。與低磷正常魚(yú)粉組相比,在其飼料中添加植酸酶能夠使WGR提高11.03%(P<0.05)、SGR提高4.71%(P<0.05)、FCR降低9.60%(P
2 體成分
由表4可知,低磷低魚(yú)粉組的全魚(yú)鈣和磷含量均顯著低于對(duì)照組(P<0.05)。與低磷正常魚(yú)粉組和正常磷低魚(yú)粉組相比,在其飼料中分別添加植酸酶和蛋白酶均能夠顯著提高全魚(yú)鈣和磷含量(P
3 腸道消化酶活性
由表5可知,低磷低魚(yú)粉組的胰蛋白酶、糜蛋白酶和淀粉酶活性顯著低于對(duì)照組(P<0.05)。與低磷正常魚(yú)粉組和正常磷低魚(yú)粉組相比,在其飼料中分別添加植酸酶和蛋白酶均能夠顯著提高胰蛋白酶、糜蛋白酶和淀粉酶活性(P
4 營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)表觀消化率
由表6可知,低磷低魚(yú)粉組的干物質(zhì)、粗蛋白質(zhì)、鈣和磷的表觀消化率均顯著低于對(duì)照組(P<0.05)。與低磷正常魚(yú)粉組和正常磷低魚(yú)粉組相比,在其飼料中分別添加植酸酶和蛋白酶均能夠顯著提高干物質(zhì)、粗蛋白質(zhì)、鈣和磷的表觀消化率(P
5 血清生化指標(biāo)
由表7可知,低磷低魚(yú)粉組的LZM活性顯著低于對(duì)照組(P<0.05),而MDA含量顯著高于對(duì)照組(P<0.05)。與低磷正常魚(yú)粉組和正常磷低魚(yú)粉組相比,在其飼料中分別添加植酸酶和蛋白酶均能夠顯著提高LZM活性和降低MDA含量(P
討論
1 低磷低魚(yú)粉飼料中添加植酸酶和蛋白酶對(duì)草魚(yú)生長(zhǎng)性能的影響
在飼料中添加酶制劑既能降解植物性飼料原料中的抗?fàn)I養(yǎng)因子,同時(shí)還可彌補(bǔ)機(jī)體內(nèi)源消化酶的不足,從而促進(jìn)動(dòng)物對(duì)飼料的消化利用,提高飼料報(bào)酬,促進(jìn)生長(zhǎng)。植酸酶可有效降解飼料中的植酸,不僅釋放出與之螯合的磷,同時(shí)還可將鈣和蛋白質(zhì)等營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)釋放出來(lái)供動(dòng)物吸收利用,減少氮、磷的排泄,提高營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)利用率,從而促進(jìn)動(dòng)物生長(zhǎng)。張曉清等的研究表明,添加300 mg/kg植酸酶能夠提高建鯉的體增重。Lu等的研究表明,添加200 mg/kg植酸酶能夠促進(jìn)黑鯛的生長(zhǎng),且可以使飼料中磷酸二氫鈣的水平從1.5%降至1.0%。在以植物蛋白質(zhì)為主要蛋白質(zhì)源的飼料中,添加植酸酶能夠促進(jìn)植酸磷水解,促進(jìn)鯽魚(yú)(Carassius auratus)生長(zhǎng)。本試驗(yàn)結(jié)果顯示,低磷飼料中添加300 mg/kg植酸酶能夠提高草魚(yú)的WGR和SGR,促進(jìn)生長(zhǎng)。這可能是因?yàn)樘砑拥闹菜崦附到饬孙暳显现械闹菜?,釋放出的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)改善了草魚(yú)的營(yíng)養(yǎng)狀態(tài),從而達(dá)到了促進(jìn)生長(zhǎng)的作用。蛋白酶能夠通過(guò)水解植物性蛋白質(zhì)原料中的抗?fàn)I養(yǎng)因子,提高水解產(chǎn)物中易被消化吸收利用的氨基酸的含量,還能激活內(nèi)源消化酶活性,從而提高動(dòng)物對(duì)植物性蛋白質(zhì)的利用率。本試驗(yàn)結(jié)果顯示,低魚(yú)粉飼料中添加500 mg/kg蛋白酶同樣能夠提高草魚(yú)的WGR和SGR,促進(jìn)其生長(zhǎng)。Li等在羅非魚(yú)上的研究顯示,飼料中添加175 mg/kg的蛋白酶能夠顯著提高增重,改善生長(zhǎng)性能。在虹鱒上的試驗(yàn)結(jié)果表明,低魚(yú)粉飼料中添加175 mg/kg蛋白酶能夠提高WGR和降低FCR,且提高率和降低率分別達(dá)到9.42%和7.80%。在異育銀鯽上的試驗(yàn)也有相似的研究結(jié)果,低魚(yú)粉飼料中添加不同水平的蛋白酶(120、150和175 mg/kg)均能提高其體增重,且提高率分別達(dá)到5.73%、22.40%和14.38%。但在虹鱒的報(bào)道中顯示,飼料中添加蛋白酶對(duì)虹鱒的生長(zhǎng)性能無(wú)顯著影響。不同試驗(yàn)結(jié)果存在差異可能與試驗(yàn)飼料類(lèi)型,試驗(yàn)魚(yú)種類(lèi)、大小,酶制劑來(lái)源和養(yǎng)殖環(huán)境不同有關(guān)。
目前,植酸酶和蛋白酶的復(fù)合使用在部分水產(chǎn)動(dòng)物上已有報(bào)道。在建鯉上的試驗(yàn)表明,低磷(1.5%→1.0%)無(wú)魚(yú)粉(6%→0)飼料中添加植酸酶和蛋白酶能夠使WGR提高8.88%。在羅非魚(yú)上的試驗(yàn)表明,低磷(1.8%→1.2%)無(wú)魚(yú)粉(6%→0)飼料中添加植酸酶和蛋白酶能夠使WGR提高13.03%。草魚(yú)是我國(guó)主要大宗水產(chǎn)養(yǎng)殖經(jīng)濟(jì)魚(yú)類(lèi),其肌肉中含有豐富的多不飽和脂肪酸,具有重要的保健功能,深受消費(fèi)者的喜歡。本研究結(jié)果顯示,在低磷(2.0%→1.3%)低魚(yú)粉(3.0%→1.5%)飼料中添加植酸酶和蛋白酶能夠提高草魚(yú)的WGR和SGR,且提高率分別達(dá)到15.71%和6.87%,此結(jié)果與上述學(xué)者的研究結(jié)果相似,表明飼料中添加植酸酶和蛋白酶能夠促進(jìn)動(dòng)物生長(zhǎng),說(shuō)明不同酶制劑的配伍使用使得酶功能產(chǎn)生了協(xié)同作用,發(fā)揮了較大的經(jīng)濟(jì)效益。但是,與對(duì)照組相比,低磷低魚(yú)粉飼料中添加植酸酶和蛋白酶后各生長(zhǎng)指標(biāo)還是低于對(duì)照組,這可能是由于降低了魚(yú)粉在飼料中的使用量,導(dǎo)致魚(yú)粉中一些微量營(yíng)養(yǎng)元素不能滿足魚(yú)體生長(zhǎng)所需,從而造成些許差異。
2 低磷低魚(yú)粉飼料中添加植酸酶和蛋白酶對(duì)草魚(yú)體成分的影響
關(guān)于植酸酶和蛋白酶對(duì)動(dòng)物體成分的影響已有諸多研究報(bào)道。Shi等的研究顯示,在低魚(yú)粉飼料中添加不同水平的蛋白酶(120、150和175 mg/kg),對(duì)異育銀鯽體成分(水分、粗蛋白質(zhì)、粗脂肪和粗灰分含量)無(wú)顯著影響。Lin等的研究顯示,飼料中添加由蛋白酶、β-葡聚糖酶和木聚糖酶組成的復(fù)合酶制劑對(duì)羅非魚(yú)全魚(yú)水分、粗蛋白質(zhì)、粗脂肪和粗灰分含量無(wú)顯著影響。張曉清等的研究顯示,低磷無(wú)魚(yú)粉飼料中添加植酸酶和蛋白酶對(duì)建鯉全魚(yú)水分、粗蛋白質(zhì)、粗脂肪和粗灰分含量均無(wú)顯著影響。此外,張瑞的研究顯示,飼料中添加植酸酶能夠提高建鯉肌肉粗蛋白質(zhì)含量,但對(duì)粗脂肪和粗灰分含量無(wú)顯著影響。張璐等在大黃魚(yú)上的研究也有類(lèi)似的結(jié)果,飼料中添加200 mg/kg植酸酶對(duì)全魚(yú)粗蛋白質(zhì)、粗脂肪含量和總能無(wú)顯著影響。本試驗(yàn)結(jié)果顯示,各組之間在草魚(yú)全魚(yú)水分、粗蛋白質(zhì)、粗脂肪和粗灰分含量方面均無(wú)顯著差異,該結(jié)果可能說(shuō)明魚(yú)類(lèi)的營(yíng)養(yǎng)組成相對(duì)穩(wěn)定,不易受到飼養(yǎng)環(huán)境和營(yíng)養(yǎng)條件的影響;但低磷低魚(yú)粉組全魚(yú)鈣、磷含量要低于對(duì)照組,表明低磷低魚(yú)粉組中的鈣、磷不能滿足魚(yú)體的生長(zhǎng)需要,從而導(dǎo)致生長(zhǎng)性能的下降;而在低磷低魚(yú)粉飼料中補(bǔ)充植酸酶和蛋白酶后,其鈣、磷的營(yíng)養(yǎng)狀況有所改善。這說(shuō)明植酸酶和蛋白酶在水解飼料原料時(shí),會(huì)釋放出鈣、磷等營(yíng)養(yǎng)物質(zhì),促進(jìn)礦物元素的沉積,從而提高動(dòng)物對(duì)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的利用。
3 低磷低魚(yú)粉飼料中添加植酸酶和蛋白酶對(duì)草魚(yú)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)表觀消化率的影響
飼料的營(yíng)養(yǎng)價(jià)值是影響動(dòng)物生長(zhǎng)的重要因素,而生產(chǎn)上常用消化率來(lái)評(píng)價(jià)飼料的營(yíng)養(yǎng)價(jià)值,進(jìn)而考察其對(duì)動(dòng)物生長(zhǎng)的影響。動(dòng)物的生長(zhǎng)與干物質(zhì)、粗蛋白質(zhì)等營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)表觀消化率呈正相關(guān)。Biswas等的研究發(fā)現(xiàn),在用豆粕部分替代魚(yú)粉的飼料中添加2000 U/kg植酸酶,能夠顯著提高真鯛(Pagrus major)蛋白質(zhì)和磷的表觀消化率,且分別較豆粕對(duì)照組提高3.26%和60.04%。在斑點(diǎn)叉尾鮰上的試驗(yàn)表明,飼料中添加植酸酶能夠提高粗蛋白質(zhì)、粗脂肪和磷的表觀消化率。同樣,在羅非魚(yú)上也有相似的研究結(jié)果。在以豆粕、葵籽粕和菜籽粕分別部分替代魚(yú)粉的飼料中添加蛋白酶、葡聚糖酶和木聚糖酶能夠提高虹鱒的粗蛋白質(zhì)和粗脂肪表觀消化率。在異育銀鯽上的試驗(yàn)表明,飼料中添加蛋白酶能夠提高干物質(zhì)和蛋白質(zhì)的表觀消化率。本試驗(yàn)結(jié)果表明,低磷低魚(yú)粉飼料中添加植酸酶和蛋白酶能夠提高草魚(yú)對(duì)干物質(zhì)、粗蛋白質(zhì)、鈣和磷的表觀消化率。這可能是由于植酸、蛋白酶抑制因子等抗?fàn)I養(yǎng)成分對(duì)魚(yú)類(lèi)的消化酶活性有抑制作用,從而抑制了營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的消化吸收。植酸酶和蛋白酶的添加一方面可以釋放出與植酸結(jié)合的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì),促進(jìn)其消化吸收利用,另一方面也能夠激活部分內(nèi)源酶,從而改善腸道對(duì)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的消化利用。因此,本試驗(yàn)繼續(xù)對(duì)植酸酶和蛋白酶對(duì)草魚(yú)腸道消化酶活性的影響進(jìn)行了研究。
4 低磷低魚(yú)粉飼料中添加植酸酶和蛋白酶對(duì)草魚(yú)腸道消化酶活性的影響
動(dòng)物的生長(zhǎng)與消化能力密切相關(guān),而消化能力受到消化酶活性的影響。胰蛋白酶、糜蛋白酶、淀粉酶以及脂肪酶是動(dòng)物胃腸道中消化營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的關(guān)鍵酶。Liu等的研究發(fā)現(xiàn),外源脂肪酶的添加能夠通過(guò)提高草魚(yú)腸道中胰蛋白酶、糜蛋白酶、脂肪酶和淀粉酶的活性提高草魚(yú)的消化能力,從而達(dá)到促進(jìn)生長(zhǎng)的作用。關(guān)于植酸酶和蛋白酶對(duì)動(dòng)物腸道消化酶活性的影響已有諸多報(bào)道。在異育銀鯽上的試驗(yàn)表明,飼料中添加植酸酶能夠提高肝胰臟和腸道蛋白酶活性。在鯉魚(yú)上的試驗(yàn)表明,低魚(yú)粉飼料中添加蛋白酶能夠高前腸和食糜蛋白酶活性。本試驗(yàn)結(jié)果表明,在低磷正常魚(yú)粉飼料中添加植酸酶,正常磷低魚(yú)粉飼料中添加蛋白酶以及低磷低魚(yú)粉飼料中添加植酸酶和蛋白酶均能在不同程度上提高草魚(yú)腸道中胰蛋白酶和糜蛋白酶的活性,與上述研究結(jié)果相似。其原因可能是植物蛋白質(zhì)源中含有的抗?fàn)I養(yǎng)因子(植酸、蛋白酶抑制因子等)可與飼料中的蛋白質(zhì)、糖類(lèi)和礦物質(zhì)等結(jié)合,導(dǎo)致底物釋放不徹底,對(duì)消化酶活性有抑制作用。而植酸酶和蛋白酶可水解飼料原料中的植酸和蛋白酶抑制因子,充分釋放結(jié)合部分,刺激機(jī)體內(nèi)源消化酶的分泌,從而提高消化酶活性。此外,在淀粉酶和脂肪酶上的研究顯示,飼料中添加植酸酶對(duì)鱸魚(yú)(Lateolabrax japonicus)胃和腸道中淀粉酶和脂肪酶的活性的影響不顯著。常青等的研究報(bào)道,蛋白酶的添加對(duì)魚(yú)體消化器官淀粉酶和脂肪酶的活性無(wú)顯著影響。本研究結(jié)果顯示,飼料中添加植酸酶和蛋白酶可提高腸道淀粉酶的活性,但對(duì)脂肪酶的活性無(wú)顯著影響。綜上所述,外源酶制劑的添加能夠通過(guò)提高消化酶活性,增強(qiáng)動(dòng)物腸道對(duì)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的消化吸收,從而促進(jìn)生長(zhǎng)。而出現(xiàn)部分試驗(yàn)結(jié)果不一致的原因可能與酶的種類(lèi)、用量,魚(yú)的品種、大小,飼料配方以及養(yǎng)殖環(huán)境有關(guān)。
5 低磷低魚(yú)粉飼料中添加植酸酶和蛋白酶對(duì)草魚(yú)血清生化指標(biāo)的影響
血液中的有效成分可以反映機(jī)體新陳代謝機(jī)能、組織及細(xì)胞通透性和健康狀態(tài)。GOT和GPT主要參與機(jī)體組織中氨基酸的轉(zhuǎn)運(yùn)。在本試驗(yàn)條件下,各組草魚(yú)血清中GOT和GPT活性無(wú)顯著差異,這與張曉清等在建鯉上的研究結(jié)果相似。LZM是魚(yú)類(lèi)先天性免疫系統(tǒng)中的重要?dú)⒕镔|(zhì),主要通過(guò)破壞病原菌的細(xì)胞壁,進(jìn)而導(dǎo)致病原菌裂解、死亡。MDA是體內(nèi)氧自由基攻擊生物膜中多不飽和脂肪酸而產(chǎn)生的重要產(chǎn)物,可以反映細(xì)胞受損傷以及脂質(zhì)過(guò)氧化程度。Adeoye等研究發(fā)現(xiàn),飼料中添加植酸酶、蛋白酶和木聚糖酶能夠增加羅非魚(yú)血清中LZM活性。另一篇在羅非魚(yú)上的研究也有相似的結(jié)果,飼料中添加木聚糖酶、蛋白酶、α-淀粉酶和纖維素酶能夠提高血清中LZM活性。而在鱘魚(yú)(Acipenser baeri Brandt ♀×A. schrenckii Brandt)上的試驗(yàn)表明,低魚(yú)粉飼料中添加植酸酶對(duì)血清LZM活性無(wú)顯著影響,但能降低血清MDA含量。本試驗(yàn)結(jié)果顯示,低磷低魚(yú)粉飼料中添加植酸酶和蛋白酶能夠提高草魚(yú)血清中LZM活性和降低MDA含量。這些結(jié)果說(shuō)明植酸酶和蛋白酶的添加能夠改善草魚(yú)的先天性免疫狀況。這可能是因?yàn)橹菜崦负偷鞍酌傅奶砑犹岣吡藙?dòng)物體對(duì)蛋白質(zhì)及其他營(yíng)養(yǎng)成分的利用率,同時(shí)也促進(jìn)了免疫相關(guān)因子的合成,進(jìn)而提高了機(jī)體的免疫力。
結(jié)論
在低磷(2.0%→1.3%)正常魚(yú)粉(3.0%)飼料中添加0.03%植酸酶、正常磷(2.0%)低魚(yú)粉(3.0%→1.5%)飼料中添加0.05%蛋白酶、低磷(2.0%→1.3%)低魚(yú)粉(3.0%→1.5%)飼料中添加0.03%植酸酶和0.05%蛋白酶均能夠提高草魚(yú)的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)表觀消化率、腸道消化酶活性和免疫力,從而改善其生長(zhǎng)性能。
養(yǎng)殖凈化酵素產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)
1000毫升/瓶,市場(chǎng)售價(jià)約120元,可以用于約10頭育肥豬或約200只家禽凈化體內(nèi)抗生素等殘留、改善肉蛋品質(zhì)(提升口感風(fēng)味)。純益生菌+酶制劑生物制品,無(wú)任何違禁物質(zhì)(客戶可以去質(zhì)檢部門(mén)進(jìn)行檢測(cè),我們也可以為您提供質(zhì)檢報(bào)告)。
關(guān)于對(duì)本產(chǎn)品效果的質(zhì)疑,最簡(jiǎn)單的做法就是你自己購(gòu)買(mǎi)一瓶回來(lái)進(jìn)行試驗(yàn),拿一些所謂的“飼料雞鴨”、淘汰種畜禽、“飼料豬”、水產(chǎn)品等進(jìn)行試驗(yàn),運(yùn)用半個(gè)月左右后,看看是否達(dá)到了肉蛋變得自然香醇、甜美(請(qǐng)親朋好友進(jìn)行品鑒,特別是湯水比較未使用的區(qū)別很大,非常自然甜香,豬排骨和雞肉變得微微翠香)?也可以去檢測(cè)抗生素、激素殘留是否下降或消失了?如果你有條件進(jìn)行的更好檢測(cè)條件,運(yùn)用前后進(jìn)行檢測(cè)肌肉中的脂肪、游離氨基酸如油酸和亞油酸等是否這些含量提高了?如果這些都看到了效果肯定了你就按照自己的思路放開(kāi)手腳做了;如果看不出效果你的損失最多也就是120元(投資購(gòu)買(mǎi)了這個(gè)產(chǎn)品進(jìn)行試驗(yàn))。
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如果運(yùn)用期間配合部分發(fā)酵飼料、發(fā)酵中草藥或者加入如養(yǎng)豬、養(yǎng)雞、鴨鵝、牛羊、水產(chǎn)養(yǎng)殖專(zhuān)用復(fù)合益生菌,養(yǎng)殖環(huán)境除臭和肉質(zhì)改良等效果更快更明顯,還會(huì)明顯增重。
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