不使用抗生素只采用發酵飼料對仔豬生長性能和糞便微生物的影響
導讀
飼用抗生素對促進動物生長與推動養殖業的發展具有很大的作用,但抗生素的長期使用會導致細菌的變異、耐藥菌株的產生、畜禽產品及環境中的藥物殘留等問題,直接或間接危害人類的健康。為此,人們開始尋找健康、環保、高效的動物飼料代替抗生素飼料。益生菌發酵飼料能改善飼料利用率、降低飼料抗營養因子等優點日益被人們接受,已成為替代抗生素的有效途徑之一。目前,益生菌發酵飼料的研究集中在單一飼料和配合飼料上,對發酵混合飼料的研究較少。本試驗在前期的玉米- 豆粕混合飼料發酵工藝優化的基礎上,探討無抗生素發酵飼料對斷奶仔豬生長性能和糞便微生物的影響,為發酵混合飼料在動物日糧中的應用提供科學依據。
1材料與方法
1. 1 無抗生素發酵飼料
無抗生素發酵飼料: 先將玉米與豆粕按各50%的比例進行稱量、粉碎和混合,作為發酵混合物原料;然后進行發酵,采用的菌種由鼠李糖乳桿菌、植物乳桿菌、枯草芽孢桿菌、地衣芽孢桿菌、酵母菌組成,料水比為1 ∶ 0.45; 35 ℃ 厭氧發酵60 h。發酵前后玉米- 豆粕營養成分變化見表1。
1.2 主要試劑
麥康凱固體培養基、亞硫酸鉍瓊脂培養基、LBS固體培養基、BS 培養基、NaCl; Tween-80; 微囊金霉素、微囊喹乙醇; 瓊脂粉、冰乙酸; 純化水。
1.3 主要儀器
1mL 移液器、100 mL 移液器、厭氧培養箱( 型號為1209) ; 恒溫生化培養箱( 型號為DHP-082) ; 超凈工作臺( 型號為JJ-CJ-2F) 。
1.4 試驗動物及分組
選擇胎次相同、體重相近的28 日齡長白二元仔豬120頭,隨機分為試驗組和對照組,每組6 個重復,每個重復10 頭豬,進行為期47 d 的飼養試驗。
1.5 試驗設計
采用對照試驗設計,對照組在基礎日糧中添加50 mg /kg 金霉素和100 mg /kg 喹乙醇; 試驗組采用10%的無抗生素發酵飼料替代基礎日糧中相應的玉米- 豆粕日糧,不添加抗生素。基礎日糧組成及營養水平見表2。
1.6 飼養管理
試驗豬飼養在同一圈舍不同欄內,各處理組的飼養管理和環境條件完全一致,均自由采食和飲水,按照常規管理方法做好驅蟲、免疫、防疫工作,每日及時清糞掃欄。認真觀察試驗豬采食、糞便和精神狀況。
1.7 測定項目及方法
1.7.1 生長性能的測定
分別于豬28 日齡和75 日齡時以重復為單位稱量試驗豬的空腹體重,同時記錄投放飼料量和剩余飼料量,計算平均日增重( ADG) 、平均日采食量( ADFI) 和料重比( F /G) 。
1.7.2 糞便微生物的測定
1) 取樣。75 日齡時在試驗組和對照組豬圈中隨機采集新鮮糞便1 g,在超凈工作臺中取采集的新鮮糞便0.1 g,加入生理鹽水0. 9 mL 稀釋,震蕩搖勻,制成1 × 10-1倍稀釋液,然后逐級稀釋至1 × 10-7倍。
2) 接種。選擇1 × 10-3~ 1 × 10-5三級稀釋液均勻涂布于麥康凱固體培養基( 腸桿菌選擇培養基)上,封口,放入37 ℃生化培養箱中,培養( 16 ± 2) h。選擇1 × 10-3~ 1 × 10-5三級稀釋液均勻涂布于亞硫酸鉍固體培養基( 沙門氏菌選擇培養基) 上,封口,放入37 ℃生化培養箱中,培養( 40 ± 2) h。選擇1 × 10-5~ 1 × 10-7三級稀釋液均勻涂布于LBS 固體培養基( 乳酸菌選擇培養基) 上,封口,放入37 ℃ 厭氧培養箱中,培養( 36 ± 2) h。選擇1 × 10-5~ 1 × 10-7三級稀釋液均勻涂布于BS 固體培養基( 雙歧桿菌選擇培養基) 上,封口,放入37 ℃厭氧培養箱中,培養( 48 ± 2) h。各種培養基每個稀釋度做2個平行。
3) 計數。在麥康凱培養基上選擇紅色或粉紅色、表面光滑、凸起、不透明、質地軟、邊緣整齊的菌落進行計數; 在亞硫酸鉍固體培養基上選擇黑色或灰綠色、有金屬光澤的菌落進行計數; 在固體培養基上選擇乳白色或白色、表面光滑、凸起、不透明、質地軟、邊緣整齊的菌落進行計數; 在BS 固體培養基上選擇灰白色或乳白色、不透明、凸起、邊緣整齊的菌落進行計數,用菌落計算公式計算菌落數。計算公式: N =ΣC÷ [( n1+ 0.1n2) d]。式中: N為所需菌落數; ΣC 為含適宜范圍菌落數的平板菌落數之和; n1為第一個適宜稀釋度平板上的菌落數; n2為第二個適宜稀釋度平板上的菌落數; d為第一適宜稀釋度。
1.8 數據的統計分析
采用SPSS 統計軟件對試驗數據進行統計分析,經單因子方差比較,結果以“平均值± 標準差”表示。
2結果與分析
2.1 無抗生素發酵飼料對斷奶仔豬生長性能的影響
由表3 可以看出,試驗組和對照組平均日增重、平均日采食量和料重比均差異顯著( P< 005) 。說明在斷奶仔豬日糧中添加10% 無抗生素發酵飼料能夠顯著提高斷奶仔豬平均日采食量、平均日增重,降低料重比( P< 0.05) 。
2.2 無抗生素發酵飼料對斷奶仔豬糞便微生物的影響
由表4 可以看出,試驗組和對照組大腸桿菌、沙門氏菌、乳酸菌、雙歧桿菌的數量均差異顯著( P<0.05) 。說明在斷奶仔豬日糧中添加10%無抗生素發酵飼料可以降低斷奶仔豬糞便中大腸桿菌和沙門氏菌的數量,同時提高乳酸菌和雙歧桿菌的數量。
3討論
近年來,使用微生物發酵飼料飼喂生豬的試驗已有報道,研究結果表明,發酵混合飼料可以提高生豬生長性能,而豬的平均日增重是衡量生豬生長性能的重要指標。發酵過程可以將飼料中的粗蛋白分解成易于吸收的小肽和氨基酸,增加血液中的總蛋白,幫助生豬胃腸道建立利于生長的新的菌群平衡,促進小腸絨毛膜的生長,保護腸黏膜的完整性,提高飼料利用率。發酵混合飼料含有大量益生菌,被采食后可以在豬體內產生大量的消化酶和有機酸,有利于豬的消化。陳玉龍等研究發現,將日糧中的普通豆粕用發酵豆粕替代,可以顯著降低料重比。胡新旭等、周映華等研究結果表明,在生長育肥豬飼料中添加20%無抗發酵飼料可以顯著提高豬的生產性能。林靖等研究發現,用5% 發酵豆粕替代日糧中的普通豆粕,可以顯著提高生長豬的生長性能。鄒文等研究結果表明,在生長育肥豬日糧中添加20%無抗發酵飼料試驗組生產性能、血液生化指標、肉品質各項指標均優于對照組。
在生豬養殖中,糞便是一項重要的污染源以及人畜共患病的主要載體。糞便中的致病菌會污染周圍環境中的水體和土壤,感染人畜。林標聲等研究結果表明,飼喂微生物發酵飼料可以顯著提高糞便中有益菌數量。辛小召等研究結果表明,飼喂濕態發酵豆粕和發酵濃縮料可以提高泌乳母豬糞便有益活菌含量。本試驗結果表明,10%無抗生素發酵飼料對提高斷奶仔豬平均日增重、平均日采食量和降低料重比的影響明顯優于添加50 mg /kg 金霉素和100 mg /kg 喹乙醇的未發酵飼料,同時降低糞便中大腸桿菌和沙門氏菌數量,提高乳酸菌和雙歧桿菌數量。本試驗研究結果與前人的研究一致,說明無抗生素發酵飼料可以維持糞便中微生物菌群的平衡。
4結論
在不添加抗生素的前提下,采用10% 無抗生素發酵飼料替代基礎日糧中相應的玉米- 豆粕型日糧,可以替代抗生素的使用,提高斷奶仔豬的平均日增重,改善料重比,調節腸道微生物菌群平衡,為無抗豬肉的生產提供可行的途徑。
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